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ß-Galactosidase

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Article No: 
10-1101-25
ß-galactosidase
Pack Size: 
25 mg (8 KU)
Price: 204 EUR

Beta Galactosidase

 

Eigenschaften

  • Hydrolase-Enzym          
  • Hydrolyse von ß-Galactosiden into Monosaccaride
  • Geliefert als lyophilisiertes Pulver
  • Hohe spezifische Aktivität

 

 

Produktbeschreibung

ß-Galactosidase ist ein Hydrolase-Enzym, das die Hydrolyse von ß-Galactosiden in Monosaccharide katalysiert. Das Protein umfasst vier Ketten und hat ein Molekulargewicht von 464 kDa, jede Untereinheit mit einem Gewicht von 116 kDa.


ß-Galaktosidase ist ein gebräuchliches Reportermolekül und ein sehr wichtiger Marker für das lacZ-Gen. Das Enzym kann in zwei Peptide gespalten werden; LacZα; und LacZΩ. Keines der beiden ist von selbst aktiv, aber beide setzen sich spontan zu einem funktionellen Enzym zusammen. Dieses Merkmal wird in vielen Klonierungsvektoren verwendet, um eine Komplementierung in spezifischen Laborstämmen von E. coli zu erreichen (das kleine LacZa-Peptid wird durch das Plasmid codiert, während das große LacZΩ in trans durch das bakterielle Chromosom codiert wird). Wenn DNA-Fragmente in den Vektor eingeführt und die Produktion von LacZα unterbrochen wird, zeigen die Zellen keine ß-Galactosidaseaktivität. Dies ermöglicht das Blau / Weiß-Screening von rekombinanten Klonen.


Die spezifische Aktivität beträgt 230-375 Einheiten / mg Protein bei 410 nm, pH 7,0 und 25ºC (0,2 M Na-Phosphat, 2 mM MgCl2, 8% Methanol, 0,25% Tween 20). Eine Einheit Enzym hydrolysiert 1 Mikromol o-Nitro-phenyl-ß-D-galactopyranosid (ONPG) (46 mM) pro Minute. Die Proteinkonzentration wird nach dem Biuret-Verfahren mit BSA als Standard untersucht. Die freien Thiolgruppen auf der Enzymoberfläche sind als 14-18 Mol / Mol Enzym charakterisiert. Diese freien Gruppen sind für die Derivatisierung des Enzyms nützlich.


Die ß-Galactosidase von Medicago wird in Fläschchen mit ca. 25 mg (8 KU) Lyophilisat des teilgereinigten Enzyms geliefert. Die Rekonstitution dieses Lyophilisats in 4 ml Wasser ergibt eine Lösung von etwa 1 mM Tris-HCl, pH 7,2 und 1 mM MgCl2.


Nur für Laborzwecke.


Anwendungen

  • Reporter-Molekül
  • Klonierungsstudien
  • Blau / weißes Screening von rekombinanten Klonen

 

 


Gebrauchsanweisung
Es sind keine zusätzlichen Mischreagenzien erforderlich. Das Material ist nicht von Raumtemperatur abhängig.



Versand und Lagerung
Das Produkt wird bei Raumtemperatur verschickt und ist bei Lagerung bei -20°C für 5 Jahre stabil.

 

Technische Daten

Erscheinung: Weißes lyophilisiertes Pulver

Aktivität: 230-375 Einheiten/mg Protein bei 410 nm, pH 7.0 und 25°C. (0,2 M Na-Phosphat, 2 mM MgCl2, 8% Methanol, 0,25% Tween 20). Eine Einheit Enzym hydrolysiert 1 Mikromol o-Nitro-phenyl-β-D-galactopyranosid (ONPG) (46 mM) pro Minute (der Extinktionskoeffizient für ONP bei 410 nm beträgt 2100 M / cm). Die Proteinkonzentration wird nach dem Biuret-Verfahren mit BSA als Standard untersucht. Die freien Thiolgruppen auf der Enzymoberfläche sind charakterisiert und betragen 14-18 Mol / Mol Enzym. Die freien Thiolgruppen sind für die Derivatisierung des Enzyms geeignet.